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豬瘟抗體檢測試劑盒
物品單位 價格 品牌
1100 賽諾利康
  • 產地:北京
  • 發布日期: 2022-03-29
  • 更新日期: 2022-07-08
產品詳細說明
產地 北京
保存條件
品牌 賽諾利康
貨號
檢測方法
CAS編號
保質期 12個月
規格
適應物種
檢測限
數量
用途范圍
標記物
純度 %
樣本
應用
是否進口

96T/192T  900/1800

豬瘟抗體檢測試劑盒

豬瘟E2(CSFV-E2)抗體ELISA檢測試劑盒,可以從豬的血液樣品中檢測到CSFV-E2抗體的量。微量板用CSFV-E2蛋白包被,將稀釋的豬血清樣品加入到微量孔中,樣品中CSFV-E2抗體將與包被的抗原形成抗原抗體復合物。非特異性抗體和其它血清蛋白被洗去。將堿性磷酸酶標記的抗豬IgG抗體加入孔中,與抗原抗體復合物結合,然后再洗去未反應的結合物。PNPP顯色劑作為底物被加入,如果CSFV-E2抗體存在,則顯黃色。顏色強度直接與樣品中的該抗體的量有關。

提供的試劑

包被板(Coated plates):包被重組豬瘟E2蛋白抗原的微量板。

酶標二抗(Conjugate reagent):堿性磷酸酶標記的抗豬抗體:內含蛋白穩定劑紅色染料的磷酸鹽緩沖液。

底物片(Substrate tablets) PNPP(4-**苯磷酸二鈉鹽):用底物緩沖液溶解后使用。

底物緩沖液(Substrate buffer):含有與酶反應相關物質的二乙醇(胺)緩沖液。

終止液(Stop Solution):含有NaOH的二乙醇(胺)緩沖液。

樣品稀釋液(Sample Diluent):含有蛋白穩定劑

洗液(Wash Buffer):含有吐溫的磷酸鹽緩沖液(粉)。

陰性對照(Negative Control):滅活的無CSFV抗體的磷酸鹽緩沖液:內含有蛋白穩定劑和die氮化鈉防腐劑(0.1% 重量/體積)及藍色染料。

陽性對照(Positive Control):含特異性CSFV抗體的磷酸鹽緩沖液:內含有蛋白穩定劑和die氮化鈉防腐劑(0.1% 重量/體積)及紅色染料。

材料和設備要求(試劑盒未提供)

的微量移液器和一次性吸頭

8或12孔道的微量移液器

稀釋樣品的塑料管

蒸餾水或去離子水

含405nm波長的酶標儀

注意事項

1.處理各種試劑要小心。終止液中含有腐蝕性的強堿,如果濺到皮膚或眼中,用大量的清水洗滌。

2.把各種生物材料都看成具有潛在的生物危險性物,包括所有的外來樣品。在銷毀之前,要用漂白(粉)或其它強氧化劑,將用過的反應板和廢棄液進行消毒。

3.不要用嘴碰移液器。在使用試劑盒中的試劑和處理樣品的地方,不要吃東西,喝水或吸煙。

4.試劑盒僅供體外使用。

5.嚴格按照檢測規程操作才能取得較好的結果。

試劑的準備

1.底物試劑:取1片底物放入潔凈容器中,加入5.5-6ml的底物緩沖溶液,混合直到完全溶解。本試劑很好是現用現配,配置好的底物溶液可以在+4℃下避光保存1周。請勿用手直接觸拿底物片。

2.洗液:將1袋洗液完全倒入1升蒸餾水或去離子水中,混合使其完全溶解。洗液可在+4℃保存1個月。

3.試劑盒中的其它成分可以直接使用,使用前要回溫至室溫(22-27℃)。

樣品的準備

每個樣品按照1:30稀釋,即在樣品稀釋板上用10μl樣品加290μl的樣品稀釋液,并在預稀釋板上記錄好樣品和對照的位置。

1.用旋渦混合器或振蕩器混合均勻。

2.每份樣品都要換一個未用過的新的吸頭。

試劑盒中的陽性和陰性對照不要稀釋??!

BioChek公司的CSFV-E2試劑盒可以通過兩種方式來進行實驗:一種是樣品孵育過夜來提高其敏感性;另一種是孵育較少時間來進行快速診斷。

雙重測試操作步驟

1.從密封袋中取出用CSFV-E2包被的反應板,在記錄紙上記錄樣品的位置。

2.在A1和B1孔中加入100μl的陰性對照。

3.在C1和D1孔中加入100μl的陽性對照。

4.將100μl稀釋好的樣品加入到相應的板孔中,用蓋子蓋住反應板,在室溫(22-27℃)下孵育60分鐘。孵育過夜(4-8℃)來提高其敏感度。

5.倒出孔中的內容物,用洗液洗4次(每孔300μl)。 一次倒轉反應板,在吸水紙上輕輕拍打。

6.各孔加100μl酶標二抗,用蓋子蓋住反應板,在室溫(22-27℃)下孵育30分鐘。

7.重復步驟5。

8.各孔加100μl底物試劑,用蓋子蓋住反應板,在室溫(22-27℃)下孵育15分鐘。

9.各孔加100μl終止液,終止反應。

10.空氣調零,以405nm的波長于酶標儀測定各孔的吸光度。

結果

為確保試驗有效,陰性對照的平均吸光度應該小于0.35,陽性對照的平均值和陰性對照的平均值之差應大于0.15。

實驗室中溫度的差異會造成OD值的偏高或偏低。根據實驗對照的結果判定實驗的有效性。

結果判定

樣品中抗體的相對含量可以參考陽性對照來計算,其關系可以通過S/P值(樣品和陽性對照的比值)來計算。

1.S/P值的計算

樣品的S/P值大于或等于0.5認為是陽性。

2.抗體滴度的計算

Log10效價=1.1×Log10S/P + 3.361

逆對數=效價

3.判定標準

S/P值效價范圍抗體狀況

≤0.499    ≤1070    陰性

≥0.500    ≥1071   陽性

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