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小反芻獸疫的流行病學及常見診斷方法


小反芻獸疫是由副黏病毒科麻疹病毒屬的小反芻獸疫病毒引起,以發熱、眼鼻黏膜卡他性炎癥、壞死性口炎、腹瀉和支氣管肺炎為主要特征,包括野生動物在內的小反芻動物的一種急性、烈性、致死性、高度接觸性傳染病。與小反芻獸疫同為麻疹病毒屬的成員還包括牛瘟病毒、人麻疹病毒、犬瘟熱病毒、海豹瘟病毒和海豚瘟病毒。其中小反芻獸疫與牛瘟具有相近的病理變化和臨床癥狀,兩者還具有血清學相關性。


小反芻獸疫是嚴重危害畜牧業生產安全的重大動物疫病,被世界動物衛生組織(OIE)列為法定報告的動物疫??;目前防控主要依靠滅活苗或弱毒苗,但在實際應用中存在著免疫持續期短、熱穩定性差、病毒毒力有返強風險等眾多缺陷;目前主要分布在非洲、阿拉伯、中東以及大陸在內的亞洲部分地區。


一、流行病學


1.1小反芻獸疫的地理分布


小反芻獸疫在1942年*次在非洲的象牙海岸被報道,隨后的調查發現小反芻獸疫廣泛流行于撒哈拉沙漠與赤道之間的大多數非洲國家。后來,小反芻獸疫的分布逐漸擴大到中東、伊朗、南亞次大陸、土耳其以及亞洲中部的部分國家。在亞洲,小反芻獸疫于1987年首次在印度南部地區出現,于1993年至1995年傳入阿拉伯半島、中東及南亞次大陸部分地區并成為了當地的地方性流行病。隨著小反芻獸疫全球范圍內的凈化,人們對小反芻獸疫的認識不斷加深,對其警性有所提高,相應的診斷技術也在不斷地改進,但更為頻繁的動物貿易、牲畜的季節性的遷移以及部分地區的游牧風俗為小反芻獸疫的傳播創造了許多條件,使之在全球范圍內的分布不斷擴大。近年來,小反芻獸疫跨國疫情多發,于2000年首次在亞洲的塔吉克斯坦、尼泊爾、中國西藏暴發。在非洲,小反芻獸疫已遍及赤道以南的剛果(2006)、肯尼亞(2006)、烏干達(2007),撒哈拉北部的摩洛哥(2008)。


根據小反芻獸疫F蛋白、H蛋白和N蛋白基因的序列比對,將世界不同地域的小反芻獸疫流行毒株劃分為4個基因群。其中,20世紀70年代在非洲西部及近年在非洲中部分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅰ系;在西非的象牙海岸、幾內亞、布基納法索分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅱ系;在東部非洲的蘇丹、也門、阿曼分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅲ系;在阿拉伯半島、中東、亞州南部地區及非洲的摩洛哥分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅳ系。


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1.2易感動物


山羊和綿羊是小反芻獸疫的易感動物,山羊較綿羊感染性高且臨床癥狀較嚴重,但也有報道稱綿羊和山羊同樣易感,甚至在小反芻獸疫暴發流行時,某些山羊不被感染或僅出現較輕的感染癥狀,而綿羊卻表現出較高的發病率和死亡率。據報道,在實驗室給同一種山羊接種不同毒株,表現出了毒株間的毒力差異,相應的不同種的山羊對同一毒株產生不同的反應。對牛和豬人工接種或接觸感染,皆不發病,但產生抗體,也不散毒。目前,由于對小反芻獸疫易感的野生動物種類信息不全面,報道過感染小反芻獸疫的野生動物主要有印度水牛、單峰駱駝、小鹿瞪羚、湯氏瞪羚、努比亞北山羊、大羚羊、美洲白尾鹿、中國巖羊。


1.3傳播方式


傳播方式主要是接觸傳播,可通過與病羊直接接觸發生傳播,病羊的鼻液、糞尿等分泌物和排泄物可含有大量的病毒,與被病毒污染的飼料、飲水、衣物、工具、圈舍和牧場等接觸也可發生間接傳播,在養殖密度較高的羊群偶爾會發生近距離的氣溶膠傳播。但與口蹄疫病毒傳播有區別,小反芻獸疫不能在空氣中長時間存活,不能通過氣溶膠長距離的傳播;因此在防控上做好養殖場及牧場的飼養欄舍、活動場地、飲水設施以及交通工具的消毒及管理,可有效防控小反芻獸疫的感染。


1.4潛伏期


小反芻獸疫一年四季均可發生,但多雨季節和干燥寒冷季節多發。潛伏期為4-5天,最長可達21天,《陸生動物衛生法典》規定為21天。如同其它動物傳染病,首次入侵時,所有易感性羊群會大爆發本病,一旦病原存在后,變為散發,隨季節性羊羔的出生而病例增加。


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二、診斷方法


根據小反芻獸疫的流行病學特點、臨床癥狀和剖檢病變等,可作出初步診斷。但應注意與巴氏桿菌病、傳染性羊胸膜肺炎、羊傳染性*、藍舌病和口蹄疫等作鑒別診斷。目前本病的實驗室診斷方法主要有以下幾種。


2.1樣品采集


以拭棒刮取睫膜炎分泌物及鼻、口腔及直腸等拭子,以及剖檢采取淋巴結、扁桃腺、脾、肺、大腸等組織塊,以干冰或冰袋冷藏送至實驗室。供病理切片的組織則以10%中性福爾馬林液保存及輸送。另采取抗凝血劑制備的全血,供病毒分離、血液學及血清學使用。


2.2常規診斷


PPRV的常規診斷技術主要有瓊脂免疫擴散試驗(AGID)、病毒分離鑒定和膠體金試紙條等。


AGID的敏感性相對較低,因此基本不用于標準診斷。血凝試驗(HA)和血凝抑制試驗(HI)可用于日常監測,此兩種技術易操作、花費少、敏感性也相對較高。

病毒分離培養通常采用非洲綠猴腎細胞(Vero細胞)進行。Sreenivasa 等于2006 年,研究發現改造過的狨猴B 淋巴細胞衍生細胞系MarmosetB95a細胞更利于PPRV 的繁殖和分離。應用此方法鑒定比較準確,但相對費時費力,不適用于PPRV 的快速檢測。


在膠體金試紙條方面,研究者成功地建立了一種特異、快速檢測PPRV抗原膠體金免疫層析試紙條。此方法與病毒分離方法相比,縮短了PPRV 抗原檢測時間、降低了檢測成本和檢測環境要求,是PPRV 檢測方法的完善,也是PPR快速診斷方法之一。


2.3病原學診斷


病原診斷主要包括特異性的cDNA 探針雜交、RT-PCR、實時熒光定量PCR、環介導等溫擴增技術(LAMP)、RT-PCR-ELISA 和抗原捕獲ELISA等。分子生物學技術雖然耗時短、靈敏度高、特異性強,但由于樣品易污染、RNA易降解等可造成不準確結果,而且檢測設備要求高、專業性要求強、檢測成本高,難以適用于大規模流行病學調查和檢驗檢疫。


2.4血清學診斷


PPRV抗體血清學診斷方法包括間接熒光抗體試驗(IFAT)、對流免疫電泳試驗(CIEP)、病毒中和試驗(VNT)和ELISA 等。其中,IFAT 和VNT 雖然是鑒別診斷PPRV 和RPV 的可靠方法,但由于此兩種方法操作復雜、耗時長、設備要求高,不適于大量樣品的檢測;而VNT 是國際貿易中要求進行的一項檢測試驗,該法靈敏度高、特異性強,但十分耗時。ELISA 方法相比上述幾種方法更加方便、快捷,適用于大量樣品的檢測診斷。


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三、小結       


小反芻獸疫已經嚴重影響了我國羊養殖業,制約著羊養殖業的持續健康發展,近期中國多地暴發小反芻獸疫疫情為我們敲起了警鐘。本文通過從該病的病原、流行病學、診斷方法等幾個方面進行闡述,為小反芻獸疫的認識和防控提供指導。目前,小反芻獸疫目前尚無有效的治療方法,當小反芻獸疫爆發前,快速確診,緊急建立免疫帶,才能有效控制該病在我國的傳播。


當前的小反芻獸疫防控措施不夠完善,建立和研究更多的防控方法成為當今科研的重中之重。雖然已有的多種新型疫苗,并在PPR的預防方面表現出較好的效果,但力求新型高效的疫苗成為科研工作的發展目標。平時做好 PPR防疫監測與風險評估工作,做好生物安全等防疫工作,同時要加強對抵抗和防御外來病的宣傳和教育,從源頭防止此病的發生。


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