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O型口蹄疫有什么癥狀


豬O型口蹄疫(FMD)是由O型口蹄疫病毒(FMDV)引起的豬的一種急性、熱性、高度觸摸性流行癥。除感染豬外,還可感染牛、羊等偶蹄動物。該病傳播敏捷,發病率高,是國際動物衛生組織(OIE)規

定有必要陳述的流行癥之一,中國政府規定為一類動物疫病。該病不光引起幼畜死亡,生產功能下降,并且嚴重影響牲畜及畜產品流轉和交易活動。


口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV抗體檢O型口蹄疫病毒抗體,用于評估口蹄疫苗免疫狀況。

ELISA法,在酶標板條微孔上預包被口蹄疫病毒抗原。在試驗中,加入稀釋后的待檢血清VP1單抗,樣本中的抗體阻斷了單抗與包被板上抗原的結合;經洗滌除去未結合的酶結合物;在微孔中加入TMB底物液,經酶催化產生的藍色信號與樣本中的抗體含量成反比,加入終止液終止反應后,用酶標儀450nm波長測定反應孔中的吸光度A值。


組份

1

1/2塊

6

6/11ml

2

11/22ml

7

1/2ml

3

50/100ml

8

0.5ml/1ml

4

11/22ml

9

2/4張

5

100ml

10

1份

自備的設備及試劑

微量移液器:μμμμ2. 一次性移液器吸頭。

量筒:4. 96孔板酶標儀。

6. 洗瓶或洗板機。


樣品制備

洗滌液的準備

10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。


注意事項

,應將試劑盒各組份放置室溫至少。

3. 底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性,使用時應該注意防護。

5. 檢測板拆封后應(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2-8℃6. 所有廢棄物在丟棄之前應合理處理以免污染。

8. 抗原包被板為一次性用品,不得重復使用;


操作步驟

每次試驗均設置陽性對照2. 將樣品稀釋液按/孔加入到微孔反應板內,之后將待檢樣品血清按/孔加入孔內并吹打混勻(移液器槍頭請勿混用);

蓋上封板膜(可按實際需要自行裁剪),置4. 250ul,后甩去孔內液體,以上步驟重復4-6次,*在干凈吸水紙上拍干。

每孔加酶結合物1. 4-6次, 方法同4。切記*在干凈吸水紙上拍干。

每孔加顯色液μ3. 50μl,使反應終止,10分鐘內測定結果。


結果判定

作參比波長)讀取吸光度試驗

(N)OD值>0.5,同時陽性對照(P)阻斷率>50%;

PI (阻斷率)=  1 —(樣品OD值 ÷ 陰性OD均值)

牛、羊樣本

PI≤45%則判斷為陰性。


PI(阻斷率)>35%則判斷為陽性;

貯存方法 2 - 8oC下貯存。


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